反相離子對色譜法建立的注意事項(二)
更新時間:2022-04-20 點擊次數(shù):956
色譜柱:月旭Ultimate® XB C18(4.6×250,5μm)。
流動相:A相:磷酸鹽緩沖液(磷酸二氫鉀6.8g/L,磷酸調(diào)整pH=2.5);
B相:甲醇/乙腈/四氫呋喃;
檢測器:280nm;
柱溫:30℃;
流速:1.0ml/min;
進樣量:10μL;
樣品溶劑:A相;
樣品溶液:L-去甲腎上腺素、腎上腺素、L-酪氨酸、多巴胺用溶劑配置成濃度均為:0.2mg/mL。
B相:10%甲醇
討論:在使用相似洗脫能力的有機相比例的情況下,同時檢測L-去甲腎上腺素、腎上腺素、L-酪氨酸、多巴胺4種物質(zhì),常用的甲醇,乙腈,四氫呋喃三種有機溶劑具有不同的分離結(jié)果,可以根據(jù)表《溶劑的選擇性特征》進行篩選。
討論:針對于易解離的物質(zhì),不同的pH會導致物質(zhì)的解離程度不一樣,進而引起保留時間的差異,反相離子對色譜法中需要物質(zhì)成為統(tǒng)一的解離狀態(tài)。