肝素親和層析 簡(jiǎn)介
更新時(shí)間:2021-12-16 點(diǎn)擊次數(shù):3775
乳鐵蛋白是哺乳動(dòng)物乳汁中富含的一種非血紅素鐵結(jié)合糖蛋白,且具有強(qiáng)大的生物功能,如抗菌、抗氧化、抗癌、促進(jìn)腸道發(fā)育和鐵吸收以及調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)等。因乳鐵蛋白具有優(yōu)質(zhì)的生物功能,免疫力低下的人群、患有感染性疾病的人群、具有骨質(zhì)疏松風(fēng)險(xiǎn)的人群,以及缺鐵性貧血人群均對(duì)于乳鐵蛋白的補(bǔ)充有所需求。
肝素(Heparin)是一種含硫酸酯的酸性多糖,可通過(guò)糖苷鍵與一些結(jié)構(gòu)糖蛋白結(jié)合,同時(shí)肝素表面的負(fù)電荷會(huì)與帶正電的蛋白質(zhì)發(fā)生離子作用。因此,肝素能和抗凝血因子III、凝血酶、類(lèi)凝血酶、重組人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子等生物大分子結(jié)合。在合適的緩沖液條件下,乳鐵蛋白與肝素可通過(guò)糖苷鍵和離子發(fā)生親和作用,故肝素也可用于純化乳及乳制品中的乳鐵蛋白。
月旭科技Heparin Tanrose 6FF/Heparin Tanrose 6HP肝素親和介質(zhì)
Heparin Tanrose 6FF/Heparin Tanrose 6HP介質(zhì)是以瓊脂糖為基架,肝素為配基的親和介質(zhì),具有物理及化學(xué)穩(wěn)定性不易脫落、使用壽命長(zhǎng)、應(yīng)用范圍廣泛的特點(diǎn)。
| 將Heparin Tanrose 6FF/Heparin Tanrose HP裝入合適的層析柱,層析用5倍柱體積的結(jié)合液進(jìn)行平衡,使填料處于與目的蛋白相同的緩沖體系下,起到保護(hù)蛋白的作用。 |
| 將樣品加到平衡好的Heparin Tanrose 6FF/Heparin Tanrose HP中(保證目的蛋白與Heparin Tanrose 6FF/Heparin Tanrose HP充分接觸,提高目的蛋白的回收率),收集流出液。 |
| 用10-15倍柱體積的洗雜液進(jìn)行清洗,去除非特異性吸附的雜蛋白,收集洗雜液。 |
| 使用5-10倍柱體積的洗脫液,收集洗脫液,即目的蛋白組分。 |
| 依次使用3倍柱體積的結(jié)合液和5倍柱體積的去離子水平衡填料,最后再用5倍柱體積的20%的乙醇平衡,然后保存在等體積的20%的乙醇中,置于4度保存,防止填料被細(xì)菌污染。 |