在日常分離分析工作中，液相色譜柱的正確使用和維護十分重要，使用是否得當，直接影響液相色譜柱的壽命，稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操縱過程中，需要留意下列題目，以維護液相色譜柱。
(3)避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的忽然變化或者使液相色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的忽然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料，因此在調(diào)節(jié)流速時應(yīng)該緩慢進行，在閥進樣時閥的轉(zhuǎn)動不能過緩。
(4)應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成，特別是反相色譜中，不應(yīng)直接從有機溶劑改變?yōu)槿渴撬粗嗳弧?/div>
(5)如使用柱溫控制裝置時，應(yīng)留意在通人活動相后才能升溫。
(6)一般說來液相色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時，才可以反沖除往留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會迅速降低柱效。
(7)選擇使用適宜的活動相，以避免固定相被破壞。有時可以在進樣器前面連接一個預柱，分析柱是鍵合硅膠時，預柱為硅膠，可使活動相在進進分析柱之前預先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
8)避免將基質(zhì)復雜的樣品尤其是生物樣品直接注人柱內(nèi)，需要對樣品進行預處理或者在進樣器和液相色譜柱之間連接一個保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。
(9)經(jīng)常用強溶劑沖洗液相色譜柱，清除保存在柱內(nèi)的雜質(zhì)。在進行清洗時，對流路系統(tǒng)中活動相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡，每種活動相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右，即常規(guī)分析需要50-75mL。
(10)保存液相色譜柱時應(yīng)將柱內(nèi)布滿乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發(fā)干燥。盡對禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或更長時間。
(11)使用過程中，假如壓力升高，一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞，這時應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M行清洗;另一種可能是大分子進人柱內(nèi)，使柱頭被污染;假如柱效降低或色譜峰變形，則可能柱頭出現(xiàn)塌陷，死體積增大。
(12)在完成分離分析工作之后，不應(yīng)立即停機，需及時對色譜分析系統(tǒng)進行沖洗，一般0.5h以上，以除往液相色譜柱內(nèi)的雜質(zhì)。
